麻痹性貝類毒素酶聯(lián)試劑盒試劑盒基于競爭性ELISA酶聯(lián)免疫的方法，麻痹性貝類毒素的抗體包被于酶標(biāo)孔內(nèi)，樣品與麻痹性貝類毒素-酶標(biāo)記物加入到微孔內(nèi)，若樣品中有麻痹性貝類毒素殘留，它將與貝類毒素-酶標(biāo)記物共同競爭酶標(biāo)板包被的抗體。加入TMB底物后，顏色發(fā)生變化，經(jīng)酶標(biāo)儀檢測讀數(shù)后確定樣品中貝類毒素的含量。顏色的深淺與毒素的殘留量成反比

警告

實驗前請閱讀以下文字，以保證獲得實驗效果。

ü 標(biāo)準(zhǔn)品中含有腹瀉性貝類毒素，請小心使用。

ü 不要使用過期的試劑盒。

ü 不同批次的試劑盒不要混用，抗體和微孔板具有盒與批次的特異性。

ü 盡量保持室溫（25±2.5）℃，避免在通風(fēng)口操作防止溫度過低，過熱和/或者蒸發(fā)。同樣的，不要在陽光直射下實驗，防止過熱及蒸發(fā)。在孵育期間，如果工作臺溫度過低，應(yīng)該鋪墊若干紙巾或者其他物料。

ü 加入樣品或者試劑到空的微孔板時，吸嘴靠于微孔接近底部，并保持接觸。

ü 孵育時間的計算越規(guī)范越好，保持添加標(biāo)準(zhǔn)品的一致性，先添加標(biāo)準(zhǔn)品后添加樣品。

ü 從低濃度到高濃度地添加標(biāo)準(zhǔn)品，降低影響標(biāo)準(zhǔn)品曲線質(zhì)量的風(fēng)險。

ü 將微孔板置于放有干燥劑的密封袋中，冷藏保存。

酶聯(lián)免疫反應(yīng)測試步驟

以下為計算份量的表格，用戶可根據(jù)自己的需要來確定需要配置多少試劑。

1) 加入50mL標(biāo)準(zhǔn)品或樣品在所設(shè)定的孔中；

2) 每孔加入50mL 貝類毒素酶標(biāo)物后，輕輕混勻20秒；

3) 室溫（25±2.5）℃下避光孵育40分鐘；

4) 每次加入1×洗液250mL，洗板3次，最后一次洗板后，倒置酶標(biāo)板于干燥紙巾上清除多余水分；

5) 加入100mL TMB底物，輕輕晃動20秒以便搖勻，避光條件下室溫（25±2.5）℃孵育12分鐘；

6) 加入50mL終止液終止反應(yīng)；

7) 酶標(biāo)儀450nm讀數(shù)。

4．結(jié)果計算

(1) 用平均相對吸光值建立標(biāo)準(zhǔn)曲線（以相對吸光值為縱坐標(biāo)，濃度為橫坐標(biāo)）

相對吸光度值 (%) = (標(biāo)準(zhǔn)或樣品吸光度值/零標(biāo)準(zhǔn)吸光度值) ´ 100

(2) 0標(biāo)準(zhǔn)品點OD在1.2-1.5之間，IC 50 在0.6-1.5ng/ml 采用四參數(shù)擬合曲線進(jìn)行含量的統(tǒng)計